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拉曼光谱仪检测分析常见FAQ

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  一、测试了一些样品,得到的是Ramanshift,但是文献是wavenumber,不知道它们之间的转换公式是怎么样的?激光波长632.8nm。
  
  waveshift拉曼位移;wavenumber波数,波长的倒数,用cm-1表示。
  
  在拉曼谱图中,横坐标表示的是拉曼位移,单位为波数。比如说硅的一阶峰其拉曼位移在520cm-1处。
  
  简单说明一下拉曼位移的计算方法:若入射光的波长为488nm,那么其对应的波数为20492cm-1;散射光的波长假如为490nm,对应的波数为20408cm-1,拉曼位移:Δν=20492-20408=84cm-1,即在拉曼谱图中,在84cm-1处有一个拉曼特征峰。
  
  拉曼位移的计算公式:Δν=入射光的波数-散射光的波数
  
  二、如何用拉曼光谱仪测透明的有机物液体,测试时放到了玻璃片上测出来的结果是玻璃的光谱。
  
  1.可能是聚焦位置不对,聚在玻璃上了。
  
  2.用凹面载玻片,液体量会比较多,然后用显微镜聚焦好就可以了,如果液体有挥发性,好液体上用盖玻片,然后焦点聚焦到盖玻片以下。
  
  3.建议:
  
  (1)有机液体里面的分析物质浓度多大?Raman测定的是散射光,所以在溶液中的强度相对比较底,故分析物浓度要大些。
  
  (2)你用的是共聚焦Raman吗?聚焦点要在毛细管的溶液里面才好。可以在溶液中放点“杂物”方便聚焦。
  
  (3)玻璃是无定形态物质,应该Raman信号比较弱才对。
  
  三、做生物样品的拉曼光谱,在获得的图里面有很强的荧光,有的说,如果拉曼得不到就用其荧光谱。那么在拉曼谱里面得到的荧光背景,是的荧光特征谱吗?这和荧光光谱仪里面的荧光图有什么区别?
  
  1.原则上说,拉曼谱中的荧光和荧光谱中的荧光是一样的,只要激发波长和功率密度相同。注意横坐标要从波数变换为纳米,即用10000000nm(1cm)除以波数就行了。但有一点要注意,不同波长的激发光照射样品,得到的拉曼相近,但荧光可以有很大不同,甚相同波长不同功率激发,荧光谱都大不一样。
  
  2.生物样品一般荧光峰比较宽,用荧光光测试之前一般先会做仪器本身曲线校正也就是仪器本身的响应曲线,这样测出的荧光峰才比较准,特别是对于宽峰更要做这个较准。
  
  而Raman光谱一般采集的区域比较窄(指的是波长区域),一般在窄的波长范围变化不大,因此一般不考虑仪器本身响应曲线误差,但是Raman光谱来测宽荧光峰,影响就比较大。
  
  四、什么是共焦显微拉曼光谱仪?
  
  1.共焦拉曼指的是空间滤波的能力和控制被分析样品的体积的能力。通常主要是利用显微镜系统来实现的。
  
  仅仅是增加一个显微镜到拉曼光谱仪上不会起到控制被测样品体积的作用的—为达到这个目的需要一个空间滤波器。
  
  2.(1)、显微是利用了显微镜,可以观测并测量微量样品,小1微米左右
  
  (2)、共焦是样品在显微镜的焦平面上,而样品的光谱信息被聚焦到CCD上,都是焦点,所以叫共聚焦
  
  3.拉曼仪器的共焦有2种呢,一种是针孔共焦,一种是赝共焦.我觉得好像不应该称为赝共焦,共聚焦有的定义说一定要针孔才是共聚焦吗?好像没有,顶多称为传统共聚焦或者针孔共聚焦、简单共聚焦之类的。
  
  显微拉曼光谱技术是将拉曼光谱分析技术与显微分析技术结合起来的一种应用技术。与其他传统技术相比,更易于直接获得大量有价值信息,共聚焦显微拉曼光谱不仅具有常规拉曼光谱的特点,还有自己的*优势。辅以高倍光学显微镜,具有微观、原位、多相态、稳定性好、空间分辨率高等特点,可实现逐点扫描,获得高分辨率的三维图像,近几年共聚焦显微拉曼光谱在肿瘤检测、文物考古、*法学等领域有着广泛的应用
  
  五、测固体粉末的拉曼图谱时,对于荧光很强的物质,应该如何处理?特别是当荧光将拉曼峰湮灭时,应该怎么办?增加照射时间的方法,连续照射了4小时,结果还是有很强的荧光。只有一台532nm的激光器,所以更换激光波长的方法不能用。还有别的方法吗?
  
  1.使用SERS技术或者使用很少量的样品进行测量,或者稀释你的样品到一些别的基体里面去,比如说KBr。
  
  2.波长不可调的话,激光强度应该是可调的,你把激光强度调低点试试。这个在光源和软件上都有调的。全调到比较低的,然后再用长时间试试。
  
  3.可以尝试找一种溶剂溶解粉末,看能不能猝灭荧光背景。采用反斯托克斯,滤光片用Nortch滤光片。
  
  六、用激光拉曼仪能测量薄膜的厚度、折射率及应力吗?它能对薄膜进行那些方面的测量呢?
  
  1.应该不能测薄膜的厚度、折射率及应力
  
  2.现在的共焦显微拉曼可以做膜及不同层膜的,用椭偏仪更好
  
  3.拉曼光谱可以测量应力,厚度不行
  
  4.应力可以测,应力有差别的时候拉曼会有微小频移,其他两种没听说过拉曼能测
  
  七、拉曼做金属氧化物含量的下限是多少?有一种氧化物的混合物,其中MoO3含量只有5%,XRD检测不到,拉曼可以吗?
  
  应该和待测样品的拉曼活性有关,并不能说一定能测到多少检测线,有些氧化物可能纯的样品也测不出光谱,信号强的则可能会低一些。
  
  八、在生物医学方面的实验中,发现温度不同时,拉曼好像也不一样。请解释一下这个现象
  
  温度升高,拉曼线会频移,线宽会变宽,只要物质状态不变,特征峰不会有太大变化,除非高温造成化学反应或者其他变化。
  
  九、文献上说,拉曼的峰强与物质的浓度是成正比关系,那么比如配置1mol/L的某溶液,和0.5mol/L的溶液,其峰强度是正好一半的关系吗?应用拉曼,是否能采用峰积分,或者用近红外那样的多元统计的办法来定量吗?准确度怎么样?
  
  存在激发效率的问题,拉曼一直以来被认为只能做半定量的研究,就是因为不是线性的。
  
  十、拉曼峰1640对应的无机物是什么东西呢?
  
  1.这个峰一般来说是C=O双键的峰,可是如果是无机物,很有可能是某一个基团的倍频峰,看看820左右或者是某两个峰的叠加。
  
  2.也有可能是在测量过程当中由于激光引起的碳化物质。还有一种可能就是C=C.
  
  3.拉曼在1610-1680波数区间有C=N双键的强吸收
  
  十一、1红外分析气体需要多高的分辨率?2拉曼光谱仪是否可分析纯金属?
  
  1,分析气体时理论上高只需0.5cm-1。实际应用上绝大部分情况下4cm-1已足够。对于气体,还是希望分辨率高一些好,一般都用1cm-1一下,这样对气体的一些微小峰的变化检测更好
  
  2,基本上不可能。金属不太可能作出来,因为一般不发生分子极化率改变。
  
  十二、测定过渡金属络合物水溶液中金属与有机物中的某个原子是否成键可以用拉曼光谱分析吗?
  
  如果键能对应的波数在100cm-1以上,估计是可以的,现在比较新的拉曼光谱仪就可以。
  
  十三、金红石和锐钛矿对紫外Raman的响应差别大不大?同样条件下的金红石和锐钛矿的Raman峰会不会差很多?
  
  用不同的激发光激发样品,若激光对样品没有破坏作用,拉曼谱图中谱峰的相对强度有时会发生一些变化,但不会*变了,否则就很难用拉曼光谱进行定性分析了。
  
  TiO2矿物的情况比较特殊,它们有三种晶型:锐钛矿、板钛石和金红石,其中板钛矿比较少见。锐钛石的特征是142cm-1左右的强峰,金红石中此峰消失或很弱。但我们经常见到的不是这两种情况,而多是介于金红石或锐钛石中间的TiO2相。有时一个颗粒中,若激光作用在不同的点上,也会打出差别较大的谱图来。
  
  峰差可能有两个原因:一是换波长后,激光与样品的作用点移动;二是激光的能量使样品的晶型发生变化。
  
  十四、什么是3CCD?
  
  CCD,是英文ChargeCoupledDevice即电荷耦合器件的缩写,它是一种特殊半导体器件,上面有很多一样的感光元件,每个感光元件叫一个像素。CCD在摄像机里是一个极其重要的部件,它起到将光线转换成电信号的作用,类似于人的眼睛,因此其性能的好坏将直接影响到摄像机的性能。
  
  衡量CCD好坏的指标很多,有像素数量,CCD尺寸,灵敏度,信噪比等,其中像素数以及CCD尺寸是重要的指标。像素数是指CCD上感光元件的数量。摄像机拍摄的画面可以理解为由很多个小的点组成,每个点就是一个像素。显然,像素数越多,画面就会越清晰,如果CCD没有足够的像素的话,拍摄出来的画面的清晰度就会大受影响,因此,理论上CCD的像素数量应该越多越好。但CCD像素数的增加会使制造成本以及成品率下降,而且在现行电视标准下,像素数增加到某一数量后,再增加对拍摄画面清晰度的提果变得不明显,因此,一般一百万左右的像素数对一般的使用已经足够了。
  
  单CCD摄像机是指摄像机里只有一片CCD并用其进行亮度信号以及彩色信号的光电转换,其中色度信号是用CCD上的一些特定的彩色遮罩装置并结合后面的电路完成的。由于一片CCD同时完成亮度信号和色度信号的转换,因此难免两全,使得拍摄出来的图像在彩色还原上达不到专业水平很的要求。为了解决这个问题,便出现了3CCD摄像机。
  
  3CCD,顾名思义,就是一台摄像机使用了3片CCD。我们知道,光线如果通过一种特殊的棱镜后,会被分为红,绿,蓝三种颜色,而这三种颜色就是我们电视使用的三基色,通过这三基色,就可以产生包括亮度信号在内的所有电视信号。如果分别用一片CCD接受每一种颜色并转换为电信号,然后经过电路处理后产生图像信号,这样,就构成了一个3CCD系统。
  
  和单CCD相比,由于3CCD分别用3个CCD转换红,绿,蓝信号,拍摄出来的图像从彩色还原上要比单CCD来的自然,亮度以及清晰度也比单CCD好。但由于使用了三片CCD,3CCD摄像机的价格要比单CCD贵很多,所以只有专业用的摄像机才会使用3CCD。
  
  

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